Lai nodrošinātu optimālu šūnu augšanu un eksperimentālos rezultātus, ir ļoti svarīgi izvēlēties pareizo kultūras aprīkojumu. Izvēloties šūnu kultūras traukus, ir svarīgi ņemt vērā tādus faktorus kā šūnu tips, jūsu kultūras īpašais mērķis, kultūras mērogs, barotnes veids, trauku materiāli un izmērs, virsmas apstrāde, vāki, lai nodrošinātu pareizu. gāzu apmaiņu, un to saderību ar jūsu laboratorijas aprīkojumu.
Šeit ir norādīti galvenie faktori, kas jāņem vērā, izvēloties pareizo šūnu kultūras trauku
1. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz šūnu tipu
Adherent šūnas
Šīm šūnām ir nepieciešama virsma, pie kuras piestiprināties un izkliedēties. Pielipušām šūnām jums būs nepieciešami trauki ar virsmas laukumu, kas nodrošina pietiekami daudz vietas šūnu piestiprināšanai un augšanai.
Piemēri Ar audu kultūru apstrādātas kolbas, Petri trauciņi un vairāku iedobju plāksnes.
Suspensijas šūnas
Šīs šūnas aug, peldot vidē, tāpēc virsma netiek ņemta vērā.
2. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz izmēru (tilpuma ietilpību)
Maza mēroga kultūras
Maza mēroga eksperimentiem vai augstas caurlaidības skrīningam mazāki trauki ir ideāli piemēroti.
Piemēri Daudzdobumu plāksnes (6, 24, 96 šūnu kultūras plates),
Petri trauciņi, vai T25 kolbas.
Liela mēroga kultūras
Ja nepieciešams audzēt lielu daudzumu šūnu, labāk ir izmantot lielākus traukus vai bioreaktorus.
Piemēri T75 un T175 šūnu kultūras kolbas, bioreaktori vai vērpšanas kolbas suspensijas šūnu kultūrām.
3. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz virsmas apstrādi
Ar audu kultūru apstrādātas virsmas
Asinsvadi ir iepriekš apstrādāti, lai veicinātu šūnu piesaisti, padarot tos piemērotus pielipušajiem šūnu tipiem. Tie parasti ir pārklāti ar tādām vielām kā kolagēns, fibronektīns vai citi ārpusšūnu matricas komponenti.
Neapstrādātas virsmas
Ideāli piemērots suspensiju kultūrām vai gadījumos, kad šūnām nav jālīp pie virsmas. Tos parasti izmanto šūnām, kas brīvi aug vidē.
4. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz materiālu
Polistirols, ko parasti izmanto standarta šūnu kultūrām. Tas ir dzidrs, ļaujot viegli vizuāli pārbaudīt, un labi darbojas gan pielipušajām, gan suspensijas šūnām.
Polikarbonātu vai polipropilēnu izmanto noteiktiem bioreaktoru lietojumiem un tvertnēm, kurām nepieciešama lielāka elastība vai īpaša virsmas apstrāde.
Stikls, ko izmanto standarta audu kultūrai izmaksu un plīstspējas dēļ, stikla trauki var būt piemēroti īpašiem lietojumiem vai liela mēroga kultūrām.
Kolbas
Vispārējai šūnu kultūrai parasti izmanto T-kolbas (T25, T75, T150). Plakanā virsma nodrošina labu vietu šūnu piestiprināšanai un augšanai. Tos var izmantot gan pielipušām šūnām, gan suspensijas kultūrām, ja tiek uzturēti atbilstoši apstākļi.
Petri trauciņi
Izplatīts maza mēroga kultūrām un eksperimentiem, kuriem nepieciešama novērošana, piemēram, koloniju veidošanās testos.
Vairāku aku plāksnes
Tie ir noderīgi augstas caurlaidības skrīningam un mazāka mēroga eksperimentiem. šķīvji ar 6, 12, 24, 48,
96Ir pieejamas 384 iedobes, un tās ir ideāli piemērotas šūnu testiem, citokīnu atbrīvošanai, zāļu testēšanai un citiem augstas caurlaidības lietojumiem.
Spinner Kolbas
Izmanto suspensijas šūnu kultūrām, īpaši lielākos apjomos, kur nepieciešama kontrolēta maisīšana, lai uzturētu šūnu augšanu un izvairītos no šūnu salipšanas.
Bioreaktori
Liela mēroga suspensijas kultūrai bioreaktori ļauj sarežģītāk kontrolēt vides apstākļus (piemēram, pH, temperatūru, oksigenāciju) un tiek izmantoti liela apjoma ražošanai, piemēram, biofarmaceitiskajā ražošanā.
6. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz sterilitāti un ventilāciju
Sterilitāte
Pārliecinieties, vai trauks ir sterils vai sterilizēts, lai izvairītos no piesārņojuma. Lielākā daļa komerciālo kultivēšanas trauku ir iepriekš sterilizēti, taču vienmēr pārbaudiet iepakojumu.
Ventilācija
Dažiem traukiem, piemēram, kolbām, ir ventilējami vāciņi vai filtri, lai nodrošinātu gaisa apmaiņu, vienlaikus novēršot piesārņojumu. Tas ir būtiski, kultivējot šūnas augsta blīvuma apstākļos.
7. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz lietošanas ērtumu
Autoklāvējamais pret vienreiz lietojamo
Dažus kultivēšanas traukus var atkārtoti izmantot autoklāvā (piem., stikla pudeles, noteiktas plastmasas kolbas), savukārt citi ir vienreiz lietojami un vienreiz lietojami (piemēram, plastmasas Petri trauciņi, vairāku iedobju plāksnes).
Pārkraušana un transportēšana
Apsveriet, cik viegli ir pārvietot šūnas starp traukiem. Piemēram, vairāku iedobju plāksnēm var būt nepieciešamas specializētas plāksnes, lai tās varētu viegli apstrādāt ar tādām iekārtām kā automatizētas pipetes.
8. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz barotnes tilpumu
Izvēlieties trauku, kurā var ievietot vēlamo barotnes daudzumu, netērējot resursus. Strādājot ar liela apjoma kultūru, var būt nepieciešamas lielākas kolbas vai bioreaktori, savukārt mazāki tilpumi ir piemēroti šūnu kultūras traukiem vai šķīvjiem.
9. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz izmaksu apsvērumiem
Vienreiz lietojamie pret atkārtoti lietojamiem
Vienreizējās lietošanas plastmasas trauki ir rentabli un samazina piesārņojuma risku, taču tie var būt dārgi liela mēroga operācijām. Atkārtoti lietojamiem stikla traukiem ir augstākas sākotnējās izmaksas, taču tos var sterilizēt un atkārtoti izmantot vairākas reizes, padarot tos ekonomiskākus ilgstošai lietošanai.
Skaļuma efektivitāte
Pārliecinieties, ka tvertnes izmērs ir atbilstošs, lai izvairītos no materiālu izšķērdēšanas, jo īpaši, ja izmantojat dārgas augšanas barotnes vai reaģentus.
10. Izvēlieties šūnu kultūras trauku, pamatojoties uz īpašām lietošanas prasībām
Attēlveidošana
Ja nepieciešams vizualizēt šūnas mikroskopā, izvēlieties traukus ar optiski skaidriem materiāliem un atbilstošiem izmēriem attēlveidošanas iestatījumam (piemēram, vairāku iedobju plāksnes liela satura skrīningam vai stikla dibena traukus dzīvu šūnu attēlveidošanai).
Kontrolēta satraukums
Suspensijas šūnu kultūrām apsveriet vērpšanas kolbas vai bioreaktorus, kas nodrošina kontrolētu maisīšanu, lai šūnas būtu vienmērīgi suspendētas.
Secinājums
Lai izvēlētos pareizo šūnu kultūras trauku, ir jāsabalansē vairāki faktori, tostarp šūnu tips, kultūras mērogs, materiālu savietojamība un īpašas eksperimentālās vajadzības. Pielipušajām šūnām būs vajadzīgas virsmas, kas veicina piestiprināšanos, savukārt suspensijas šūnām ir lielāks apjoms un maisīšana. Maza mēroga darbiem var pietikt ar vairāku iedobju plāksnēm vai T veida kolbām, savukārt lielākām kultūrām var būt nepieciešamas vērpšanas kolbas vai bioreaktori. Vienmēr pārliecinieties, ka trauki atbilst jūsu sterilitātes un apstrādes prasībām, un apsveriet izmaksu efektivitāti, pamatojoties uz jūsu lietojumu.
Ņemot vērā šos faktorus, jūs varat izvēlēties optimālo trauku, kas nodrošina pareizos apstākļus jūsu šūnu kultūrai un eksperimentālajiem mērķiem.