> Emuārs > Nozares ziņas

Kāpēc šūnu kultūra vispirms lizē sarkanās asins šūnas?

2022-12-23

Pamata ievads
Eritrocītu lizāts ir viena no vienkāršākajām un vienkāršākajām metodēm sarkano asins šūnu noņemšanai, tas ir, sarkano asins šūnu sadalīšanai ar lizātu, kas nebojā kodola šūnas un var pilnībā noņemt sarkanās asins šūnas. Lizāta šķelšana ir viegla sarkano asins šūnu noņemšanas metode, ko galvenokārt izmanto enzīmu gremošanas rezultātā izkliedētu audu šūnu atdalīšanai un attīrīšanai, limfocītu atdalīšanai un attīrīšanai, kā arī sarkano asins šūnu noņemšanai audu proteīna un nukleīna eksperimentos. skābes ekstrakcija. Audu šūnas, kas iegūtas ar sarkano asins šūnu lizātu, nesatur sarkanās asins šūnas, un tās var tālāk izmantot primārajai kultūrai, šūnu saplūšanai, plūsmas citometrijai, nukleīnskābju un olbaltumvielu atdalīšanai un ekstrakcijai utt.

Lietošanas instrukcija
Audu šūnu paraugs
1. Svaigi audi tika sagremoti ar aizkuņģa dziedzeri/enzīmu vai kolagenāzi un izkliedēti vienas šūnas suspensijā, un supernatants tika izmests, centrifugējot.

2. Izņemiet ELS lizātu no ledusskapja 4 °C temperatūrā, pievienojiet ELS lizātu šūnu nogulsnēm proporcijā 1:3-5 (pievienojiet 3-5 ml lizāta uz 1 ml sablīvētas šūnas), viegli izpūtiet un samaisiet.

3. Centrifugējiet pie 800-1000 apgr./min 5-8 minūtes un izmetiet augšējo sarkano dzidru šķidrumu.

4. Nogulsnētā daļa tika savākta un centrifugēta ar Henka šķīdumu vai bez seruma kultūras šķīdumu 2-3 reizes.

5, ja plaisāšana nav pilnīga/pilnīga, var atkārtot 2. un 3. darbību.

6. Šūnu resuspensija turpmākajiem eksperimentiem; Ja RNS tiek ekstrahēts, vislabāk to darīt šķīdumā, kas sagatavots no 4. darbības, izmantojot DEPC ūdeni

Sarkano asins šūnu dzīves cikls ir ļoti īss, tikai 120 dienas, bet tās ļoti ātri vairojas asinis, un šajā gadījumā tās ir īpaši spējīgas uz šūnu dalīšanos, turklāt tās ir visātrāk dalošās šūnas, tāpēc šī šūna ir ļoti vērtīga, tāpēc tas ir ļoti noderīgs šūnu kultūrai. Tas ir ļoti vienkārši, tajā nav nekādu organellu, tikai šūnu membrānas un olbaltumvielas.

Iepriekšējais:Kādas ir ELISA komplekta funkcijas?

Nākamais:Prasības reaģentam un šķīduma koncentrācijas pamata attēlojums.