Mājas > Emuārs > Nozares ziņas

Kādas ir ELISA komplekta funkcijas?

2022-12-23

ELISA komplekta pamatā ir antigēna vai antivielas cietā fāze un antigēna vai antivielas enzīmu marķēšana. Antigēns vai antiviela, kas saistīta ar cietā nesēja virsmu, joprojām saglabā savu imunoloģisko aktivitāti, un ar enzīmu iezīmētais antigēns vai antiviela saglabā gan savu imunoloģisko aktivitāti, gan enzīma aktivitāti. Noteikšanas laikā pārbaudāmais paraugs (kurā tiek mērīta antiviela vai antigēns) reaģē ar antigēnu vai antivielu uz cietā nesēja virsmas. Antigēna-antivielu komplekss, kas veidojas uz cietā nesēja, tiek atdalīts no citām šķidrumā esošajām vielām, mazgājot.

Tiek pievienoti ar enzīmu iezīmēti antigēni vai antivielas, kas reakcijas rezultātā arī saistās ar cieto nesēju. Šajā laikā fermenta daudzums cietajā fāzē ir proporcionāls vielas daudzumam paraugā. Pēc fermenta reakcijas substrāta pievienošanas enzīms katalizē substrātu, lai tas kļūtu par krāsainiem produktiem. Produkta daudzums ir tieši saistīts ar pārbaudāmās vielas daudzumu paraugā, tāpēc var veikt kvalitatīvu vai kvantitatīvu analīzi atbilstoši krāsas dziļumam.

Fermentu augstā katalītiskā efektivitāte netieši pastiprina imūnās atbildes rezultātus, padarot testu ļoti jutīgu. ELISA var izmantot, lai noteiktu antigēnus, bet to var izmantot arī antivielu noteikšanai.

ELISA komplekta pamatprincipi
Tas izmanto specifisku antigēna un antivielu reakciju, lai savienotu objektu ar fermentu, un pēc tam kvantitatīvās noteikšanas nolūkā rada krāsu reakciju starp fermentu un substrātu. Mērīšanas objekts var būt antiviela vai antigēns.

Šai noteikšanas metodei ir nepieciešami trīs reaģenti:
â  Cietās fāzes antigēns vai antiviela (imūnadsorbents)
â¡ Ar enzīmu iezīmēts antigēns vai antiviela (marķieris)
⢠substrāts enzīmu darbībai (krāsu attīstīšanas līdzeklis)

Mērīšanā antigēns (antiviela) vispirms tiek piesaistīts cietajam nesējam, bet joprojām saglabā savu imūno aktivitāti, un pēc tam tiek pievienots antivielas (antigēna) un enzīma konjugāts (marķieris), kas joprojām saglabā savu sākotnējo imūno aktivitāti un enzīmu. aktivitāte. Kad konjugāts reaģē ar antigēnu (antivielu) uz cietā nesēja, tiek pievienots attiecīgais fermenta substrāts. Tas ir, katalītiskā hidrolīze vai REDOX reakcija un krāsa.

Krāsas tonis, ko tas rada, ir proporcionāls izmērāmā antigēna (antivielas) daudzumam. Šo krāsaino produktu var novērot ar neapbruņotu aci, optisko mikroskopu, elektronu mikroskopu, var izmērīt arī ar spektrofotometru (enzīmu etiķetes instrumentu). Metode ir vienkārša, ērta, ātra un specifiska.

X
We use cookies to offer you a better browsing experience, analyze site traffic and personalize content. By using this site, you agree to our use of cookies. Privacy Policy
Reject Accept